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制備單克隆有方法有哪些？

艾柏森生物科技有限公司目前制備大量單克隆抗體的方法主要有兩種：一種是動(dòng)物體內(nèi)誘生法；另一種是體外培養(yǎng)法。背景BACKGROUND困惑PUZZLED體外培養(yǎng)法有哪幾種培養(yǎng)方式？何謂無(wú)血清培養(yǎng)？探索在體外培養(yǎng)法中,目前各個(gè)實(shí)驗(yàn)室普遍采用細(xì)胞單層法,就是將雜交瘤細(xì)胞加入培養(yǎng)瓶中，用*培養(yǎng)基培養(yǎng)，細(xì)胞濃度以1.0X100~2.0X106個(gè)/mL為宜，然后收集培養(yǎng)上清液。如果希望在體外高效率地大量制備單克隆抗體，就必須高密度培養(yǎng)單克隆抗體細(xì)胞株，充分利用培養(yǎng)基的立體空間。單位體積內(nèi)細(xì)胞...

技術(shù)服務(wù) 膜蛋白抗體制備服務(wù)

對(duì)于絕大多數(shù)的可溶性蛋白抗原，我們可以制備全長(zhǎng)的蛋白抗原以免疫動(dòng)物制備抗體，但是對(duì)于那些依托雙脂層膜結(jié)構(gòu)建立起來(lái)的多次跨膜蛋白，抗體的制備就沒(méi)那么簡(jiǎn)單了。比如G蛋白偶聯(lián)受體（GPCR）蛋白就是一個(gè)典型的大型、多次跨膜的重要蛋白家族，它是許多疾病的病理信號(hào)參與者，同時(shí)也是近一半現(xiàn)代藥物的作用靶點(diǎn)。然而要想制備GPCR的抗體確實(shí)非常困難，這主要有兩方面因素造成，一是眾多的跨膜區(qū)間造成蛋白的一級(jí)結(jié)構(gòu)被分割成彼此間隔在細(xì)胞膜內(nèi)外兩側(cè)的多個(gè)區(qū)域，而人為去掉這些結(jié)構(gòu)則會(huì)造成蛋白構(gòu)象喪失原...

功能阻遏\專一型抗抗體制備

雖然種類繁多的抗原在免疫動(dòng)物體內(nèi)可產(chǎn)生種類更加豐富的抗體，這是因?yàn)橥环N抗原經(jīng)過(guò)免疫細(xì)胞的加工，可以呈遞給B淋巴細(xì)胞多種不同的抗原信息，所以抗原與配對(duì)的抗體是多對(duì)一的關(guān)系，但是反過(guò)來(lái)對(duì)于一種抗體，往往能識(shí)別的抗原或特定的抗原信息只有一個(gè)。在構(gòu)成一個(gè)抗體的數(shù)百個(gè)氨基酸中，其實(shí)大部分序列在同一個(gè)抗體亞型家族中高度保守，只有其中的一小部分與抗原結(jié)合關(guān)系密切的氨基酸序列是識(shí)別某一特定抗原的抗體所*的序列。在許多醫(yī)學(xué)藥學(xué)或生物學(xué)的研究中，時(shí)常需要將某種抗原（比如某種藥物）誘導(dǎo)產(chǎn)生的專一...

技術(shù)服務(wù) 捕獲\報(bào)告配對(duì)抗體制備

技術(shù)介紹：抗體對(duì)在蛋白質(zhì)定量中有廣泛應(yīng)用，夾心ELISA(SandwichELISA)、化學(xué)發(fā)光和免疫層析，都離不開(kāi)高質(zhì)量的抗體對(duì)。我司研發(fā)團(tuán)隊(duì)擁有豐富的單抗開(kāi)發(fā)經(jīng)驗(yàn)，可提供優(yōu)質(zhì)可靠的配對(duì)單抗定制服務(wù)。我們提供的配對(duì)單抗定制服務(wù)的篩選方法，基于雙抗體夾心ELISA檢測(cè)。該方法的原理是將特異性抗體（捕獲抗體）結(jié)合到固相載體上形成固相抗體，然后加入待檢樣品，捕獲抗體與待檢樣品的抗原結(jié)合形成免疫復(fù)合物，洗滌后再加酶標(biāo)記抗體（檢測(cè)抗體），與免疫復(fù)合物中抗原結(jié)合形成酶標(biāo)抗體-抗原-固相...

技術(shù)服務(wù) 配體模擬激活性抗體制備

技術(shù)簡(jiǎn)介細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)是細(xì)胞功能組學(xué)研究的核心內(nèi)容。而受體配體結(jié)合啟動(dòng)細(xì)胞信號(hào)活動(dòng)是許多激活或抑制性信號(hào)通路關(guān)鍵的起始步驟。通過(guò)制備細(xì)胞表面信號(hào)受體的相關(guān)抗體，然后用抗體模擬受體的原配體細(xì)胞表面受體結(jié)合，從而啟動(dòng)細(xì)胞信號(hào)通路，這樣的抗體我們稱之為配體模擬激活性抗體。這其中經(jīng)典的例子莫過(guò)于一些在腫瘤靶向治療中使用的抗體藥物，目前，臨床上至少有11種單克隆抗體藥物被認(rèn)定為是以受體激活方式發(fā)揮功能的。目前除了常規(guī)的兔、鼠多抗和鼠單抗雜交瘤細(xì)胞制備篩選方案，基于噬菌體展示技術(shù)，本公司目...

技術(shù)服務(wù) 抗專一亞型抗體制備

技術(shù)簡(jiǎn)介動(dòng)物的免疫過(guò)程是在集體多種器官和細(xì)胞的參與下完成的，所以即便是用同一種抗原免疫，在同一個(gè)免疫周期中，受試動(dòng)物針對(duì)同一抗原產(chǎn)生的抗體也存在極大的差別。以人和小鼠為例，機(jī)體內(nèi)存在有IgG,IgA,IgM,IgE和IgD五種亞型的抗體，其中IgG依二硫鍵的位置不同又分為四個(gè)輕微差異的亞型，稱為同型。在一些免疫學(xué)試驗(yàn)中，為了觀察受試動(dòng)物免疫反應(yīng)所處的階段，常常需要以受試動(dòng)物產(chǎn)生的主體抗體亞型為線索，對(duì)特定亞型的抗體實(shí)現(xiàn)捕獲或標(biāo)記，同時(shí)無(wú)需專一性的識(shí)別針對(duì)特定抗原的抗體，這就是...

蛋白異源表達(dá)純化那些事兒

研究蛋白質(zhì)功能、生產(chǎn)功能型蛋白質(zhì)基本都離不開(kāi)蛋白質(zhì)的異源表達(dá)及純化，今天小編將從以下幾個(gè)方面與大家聊一聊蛋白質(zhì)表達(dá)、純化的那些事。1、標(biāo)簽選擇目前常見(jiàn)的表達(dá)標(biāo)簽有His-tag（組氨酸標(biāo)簽）、GST-tag（谷胱甘肽巰基轉(zhuǎn)移酶標(biāo)簽）、MBP-tag（麥芽糖結(jié)合蛋白標(biāo)簽）、CBD-tag（幾丁質(zhì)結(jié)合區(qū)標(biāo)簽）等。每種標(biāo)簽都具有*的性質(zhì)，比如標(biāo)簽的分子量、對(duì)蛋白可溶性的調(diào)節(jié)能力、對(duì)蛋白折疊的影響、是否需切除等。根據(jù)自己要純化的蛋白的特性，選擇合適的標(biāo)簽。標(biāo)簽選的好，后續(xù)的實(shí)驗(yàn)事半功...

技術(shù)服務(wù) 轉(zhuǎn)錄后特殊修飾結(jié)構(gòu)識(shí)別抗體制備

真核生物有著復(fù)雜的轉(zhuǎn)錄后修飾加工過(guò)程，如糖基化，甲基化，磷酸化，乙?；鹊?，特定位點(diǎn)的修飾狀況往往與蛋白的功能發(fā)揮直接掛鉤，為了檢測(cè)這些修飾，轉(zhuǎn)錄后修飾結(jié)構(gòu)識(shí)別抗體則成為了現(xiàn)代蛋白功能組學(xué)、表觀遺傳學(xué)所需的*材料。艾柏森生物結(jié)合多年的小分子半抗原抗體制備經(jīng)驗(yàn)，結(jié)合多肽設(shè)計(jì)合成技術(shù)優(yōu)勢(shì)發(fā)展了一整套的轉(zhuǎn)錄后修飾結(jié)構(gòu)抗體制備技術(shù)路線。我們不僅能制備可反映全蛋白組環(huán)境（例如某種組織或者細(xì)胞的全裂解液）某一修飾基團(tuán)的表達(dá)水平的修飾基團(tuán)識(shí)別抗體，還能夠制備專一性識(shí)別蛋白特定位置修飾情況的...