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T載體的作用以及克隆時為什么要用T載體？

T載體又叫T質(zhì)粒載體，是指T4噬菌體DNA連接酶，作用是在有Mg2、ATP存在的連接緩沖系統(tǒng)中，將分別經(jīng)酶切的zd載體分子與外源DNA分子進行連接。DNA連接酶有兩種：T4噬菌體DNA連接酶和大腸桿菌DNA連接酶。兩種DNA連接酶都有將兩個帶有相同粘性末端的DNA分子連在一起的功能，而且T4噬菌體DNA連接酶還有一種大腸桿菌DNA連接酶沒有的特性，即能使兩個平末端的雙鏈DNA分子連接起來。T4噬菌體DNA連接酶催化DNA連接反應內(nèi)分為3步：首先，T4DNA連接酶與輔因子ATP...

安諾倫代理BioGems 品牌產(chǎn)品——流式細胞術(shù)產(chǎn)品

peprotech(派普泰克)公司創(chuàng)立于1988年，總部位于美國新澤西洲。peprotech公司始終致力于為生命科學研究和細胞治療市場提供高品質(zhì)的細胞因子產(chǎn)品。經(jīng)過20多年的發(fā)展，peprotech公司已成為能提供多種高質(zhì)量細胞因子和重組蛋白，相應的單克隆、多克隆和生物素標記抗體，以及elisa試劑盒的世界。2010年，peprotech公司在江蘇省蘇州市設立其在中國的常駐代表機構(gòu)，負責對其產(chǎn)品進行技術(shù)支持和市場推廣。2014年peprotech公司推出自己的流式細胞術(shù)產(chǎn)品品...

噬菌體展示系列之抗體親和力成熟

近年來，隨著抗體藥物的廣泛上市，抗體已經(jīng)取代基因治療成為生物制藥領(lǐng)域的主要生力軍。而抗體在疾病診斷、治療和預防方面的作用很大程度上取決于其親和力的高低，隨著抗體工程技術(shù)的不斷發(fā)展，如何提高抗體親和力已成為抗體工程的難題之一。圍繞這一問題人們已經(jīng)從不同的角度展開了研究，例如，提高抗體庫的質(zhì)量、增加抗體庫的多樣性、進行抗體重鏈或輕鏈的替換以及點突變有目的進行氨基酸替換等都能不同程度地提高抗體親和力。抗體親和力表示抗體與抗原結(jié)合能力的大小。抗體親和力成熟是指機體正常存在的一種免疫功...

轉(zhuǎn)染、轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導你還在傻傻分不清？

一、什么是轉(zhuǎn)染?轉(zhuǎn)染(transfection)是真核細胞主動或被動導入外源DNA片段而獲得新的表型的過程。常規(guī)轉(zhuǎn)染技術(shù)可分為兩大類，一類是瞬時轉(zhuǎn)染，一類是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染（永jiu轉(zhuǎn)染）。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中，因此一個宿主細胞中可存在多個拷貝數(shù)，產(chǎn)生高水平的表達，但通常只持續(xù)幾天，多用于啟動子和其它調(diào)控元件的分析。一般來說，超螺旋質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染效率較高，在轉(zhuǎn)染后24-72小時內(nèi)（依賴于各種不同的構(gòu)建）分析結(jié)果，常常用到一些報告系統(tǒng)如熒光蛋白，β半乳糖苷酶等來幫...

【行業(yè)動態(tài)】CAR-T細胞療法最新研究進展！

CAR-T(ChimericAntigenReceptorT-CellImmunotherapy)，即嵌合抗原受體T細胞免疫療法。該療法是一種出現(xiàn)了很多年但近幾年才被改良使用到臨床中的新型細胞療法。在急性白血病和非霍奇金淋巴瘤的治療上有著顯著的療效，被認為是最有前景的腫瘤治療方式之一。正如所有的技術(shù)一樣，CAR-T技術(shù)也經(jīng)歷一個漫長的演化過程，正是在這一系列的演化過程中，CAR-T技術(shù)逐漸走向成熟這種新的治療策略的關(guān)鍵之處在于識別靶細胞的被稱作嵌合抗原受體（chimerica...

安諾倫代理ACRO品牌產(chǎn)品——優(yōu)質(zhì)蛋白供應商

ACROBiosystems公司是一個具有全球范圍影響力的生物技術(shù)lingdao品牌，其運營包擴了位于北美、歐洲和亞洲的數(shù)家公司，主要為生命科學研究、生物制藥與疫病診斷等行業(yè)提供產(chǎn)品、技術(shù)服務和臨床應用等解決方案，同時致力于在蛋白組學、藥物發(fā)現(xiàn)和細胞治療等領(lǐng)域推廣面向工業(yè)化和臨床轉(zhuǎn)化的技術(shù)和產(chǎn)品。ACROBiosystems的業(yè)務遍及全球60多個國家和地區(qū)，并通過在中國、英國等世界范圍的不同時區(qū)設立分支機構(gòu)以服務于當?shù)乜蛻襞c經(jīng)銷商。ACROBiosystems中國公司成立于2...

多克隆抗體是由多個抗原決定簇組成的

多克隆抗體通常是由多個抗原決定簇組成的，由一種抗原決定簇刺激機體，由一個B淋巴細胞接受該抗原刺激所產(chǎn)生的抗體稱之為單克隆抗體（MonoclonalAntibody）。由多種抗原決定簇刺激機體，相應地就產(chǎn)生各種各樣的單克隆抗體，這些單克隆抗體混雜在一起就是多克隆抗體，機體內(nèi)所產(chǎn)生的抗體就是多克隆抗體；除了抗原決定簇的多樣性以外，同樣一種抗原決定簇，也可刺激機體產(chǎn)生IgG、IgM、IgA、IgE和IgD等五類抗體?？乖碳C體，產(chǎn)生免疫學反應，由機體的漿細胞合成并分泌的與抗原有特...

噬菌體的分離與純化

實驗原理噬菌體感染宿主細胞后，其DNA(或RNA)在細胞體內(nèi)進行復制、轉(zhuǎn)錄，相關(guān)基因表達，裝配成完整的噬菌體顆粒，最后裂解宿主細胞或通過擠出方式從宿主細胞(宿主細胞不被殺死，如M1噬菌體)中釋放出來。因此，①在液體培養(yǎng)基中可使渾濁的菌懸液變?yōu)榍辶粱蜉^清亮。利用噬菌體的這種特性，在樣品中加入敏感菌株與液體培養(yǎng)基混合后培養(yǎng)，噬菌體便能大量增殖，釋放，從而可分離到特定的噬菌體。②在有宿主細菌生長的軟瓊脂平板上，噬菌體可裂解細菌或限制被染細菌的生長，形成透明的或渾濁的空斑，亦稱噬菌斑...