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技術(shù)文章

TECHNICAL ARTICLES

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  • 20221-19
    抗體&蛋白純化服務(wù)

    蛋白純化是利用不同蛋白間內(nèi)在的相似性與差異,利用各種蛋白間的相似性來(lái)除去非蛋白物質(zhì)的污染,而利用各蛋白質(zhì)的差異將目的蛋白從其他蛋白中純化出來(lái)。每種蛋白間的大小、形狀、電荷、疏水性、溶解度和生物學(xué)活性都會(huì)有差異,利用這些差異可將蛋白從混合物如大腸桿菌裂解物中提取出來(lái)得到重組蛋白。艾柏森生物可以提供大規(guī)模蛋白純化、融合標(biāo)簽蛋白純化、無(wú)標(biāo)簽蛋白純化等多種蛋白純化技術(shù)服務(wù)。艾柏森生物蛋白純化服務(wù)包括:1.抗體純化(ProteinA/G)2.工業(yè)級(jí)別大規(guī)模純化服務(wù)3.膜蛋白純化服務(wù)4....

  • 20221-18
    大腸桿菌在表達(dá)蛋白過(guò)程中越來(lái)越少?

    大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)是目前應(yīng)用*泛地蛋白表達(dá)系統(tǒng)。它具有:遺傳背景清楚;易于培養(yǎng)和控制;轉(zhuǎn)化操作簡(jiǎn)單;表達(dá)水平高;成本低;周期短等特點(diǎn)。同時(shí)是常用也是經(jīng)濟(jì)實(shí)惠的蛋白表達(dá)系統(tǒng),在基因表達(dá)技術(shù)中發(fā)展最早。主要可能有兩種原因,一種是大腸在加入IPTG等誘導(dǎo)劑后大腸停止生長(zhǎng)或者裂解,這時(shí)候我們要考慮蛋白本身對(duì)該菌是有一定毒性的,這時(shí)候我們可以選擇一些采用嚴(yán)緊控制的宿主菌株,比如帶有pLysS的菌株。另外一種原因就是很令人頭疼的了,當(dāng)我們發(fā)現(xiàn)出現(xiàn)大面積搖瓶中細(xì)菌量逐漸降低甚至培養(yǎng)基回復(fù)到澄...

  • 20221-18
    如何對(duì)包涵體蛋白進(jìn)行表達(dá)與復(fù)性

    關(guān)于包涵體的復(fù)性一直是生物制藥的瓶頸,包涵體的處理一般包括這么幾步:菌體的破碎、包涵體的洗滌、溶解、復(fù)性以及純化。一、包涵體蛋白的表達(dá)在平板上挑取單菌落,接種于含有氨芐青霉素和卡那霉素抗性的5mlLB培養(yǎng)基中,37℃過(guò)夜培養(yǎng),然后轉(zhuǎn)接到100mlLB培養(yǎng)基中,37℃培養(yǎng)至A600為0.4~0.6時(shí),加入IPTG至終濃度為0.5mmol/L誘導(dǎo)3.5h。8000r/min離心5min收集菌體,加入10ml50mmol/LTris-HCl,冰浴下超聲波破碎后12000r/min離...

  • 20221-13
    多克隆抗體制備的常見(jiàn)問(wèn)題解析

    多克隆抗體制備能識(shí)別出與免疫原蛋白具有高同源性的蛋白,或者從非免疫原物種的組織樣品中篩選靶蛋白,例如當(dāng)未測(cè)試物種中的抗原性質(zhì)未知時(shí),有時(shí)會(huì)使用多克隆抗體??勺R(shí)別多個(gè)結(jié)構(gòu)域,即使原始抗原的一些空間結(jié)構(gòu)或者序列發(fā)生小變化或者部分抗原決定簇變化,仍可以識(shí)別抗原,因此有更大的適應(yīng)性。多克隆抗體制備的常見(jiàn)問(wèn)題解析:1、免疫動(dòng)物該如何選擇?選擇宿主動(dòng)物時(shí),一般要考慮兩個(gè)問(wèn)題:(1)免疫效果能否保證。特別是對(duì)于蛋白抗原的情況,為了保證免疫成功,就要求宿主動(dòng)物與抗原來(lái)源物種之間有較遠(yuǎn)的親緣關(guān)...

  • 20221-12
    雙特異性T細(xì)胞銜接抗體

    雙特異性抗體(bispecificantibody,BsAb),擁有兩個(gè)不同的抗原結(jié)合位點(diǎn),從而同時(shí)與兩個(gè)靶抗原結(jié)合,在發(fā)揮抗體靶向性的同時(shí),介導(dǎo)另外一種特殊的功能,例如一個(gè)結(jié)合靶細(xì)胞上的特異抗原,另一個(gè)結(jié)合淋巴細(xì)胞或者吞噬細(xì)胞等效應(yīng)細(xì)胞,從而在腫瘤診斷及治療過(guò)程中發(fā)揮傳統(tǒng)抗體**的優(yōu)勢(shì)。作為最新應(yīng)用的BispecificTCellEngager(BiTE)與傳統(tǒng)抗體相比在組織滲透率、殺傷腫瘤細(xì)胞效率、脫靶率和臨床適應(yīng)癥等指標(biāo)方面具有較強(qiáng)的競(jìng)爭(zhēng)力,臨床應(yīng)用優(yōu)勢(shì)顯著。特別在使用...

  • 20221-11
    安諾倫代理Detroit R&D品牌——用于心血管疾病和癌癥的研究

    DetroitR&D,Inc.成立于1997年,由HyesookKim博士創(chuàng)立,致力于通過(guò)jianduan技術(shù)提供最高質(zhì)量的產(chǎn)品,與研究界建立信任關(guān)系。底特律研發(fā)一直穩(wěn)步建立自己作為一個(gè)世界范圍內(nèi)的新型診斷和藥物篩選產(chǎn)品的來(lái)源。DetroitR&D研發(fā)實(shí)驗(yàn)室和辦公室位于密歇根州底特律市一個(gè)新的再開(kāi)發(fā)區(qū)的中心。DetroitR&D研發(fā)公司的原始項(xiàng)目旨在開(kāi)發(fā)簡(jiǎn)單廉價(jià)的高血壓試劑盒,用于測(cè)量血液,尿液和組織中的新型脂肪酸生物標(biāo)志物,現(xiàn)已發(fā)展成為一家在高血壓,中風(fēng),心血管疾病和糖尿病...

  • 20221-11
    支原體污染細(xì)胞后清除支原體常用方法有哪些?

    1)對(duì)于非重要的細(xì)胞,如培養(yǎng)中的細(xì)胞、WCB的細(xì)胞等,將培養(yǎng)物與用過(guò)的培養(yǎng)基滅活后丟棄即可。對(duì)于較為重要的細(xì)胞,如來(lái)源珍貴或?qū)嶒?yàn)室中細(xì)胞保藏量較小等可以采用以下(2)-(8)的方法。2)動(dòng)物體內(nèi)接種除菌法:把受支原體污染的腫瘤細(xì)胞接種在同種動(dòng)物皮下或腹腔中,借動(dòng)物免疫系統(tǒng)消滅支原體,而腫瘤細(xì)胞卻能在體內(nèi)繼續(xù)生長(zhǎng),待一定時(shí)間后,從體內(nèi)取出細(xì)胞再進(jìn)行培養(yǎng)繁殖。3)用清洗純化法清除支原體污染的方法:細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)馴化→優(yōu)質(zhì)細(xì)胞群的篩選→細(xì)胞清洗→反復(fù)離心洗滌,其原理是利用離心力、細(xì)胞、微...

  • 20221-10
    單克隆抗體/雜交瘤細(xì)胞定制服務(wù)

    雜交瘤技術(shù)的基本原理是通過(guò)融合兩種細(xì)胞而同時(shí)保持兩者的主要特征。這兩種細(xì)胞分別是經(jīng)抗原免疫的免疫動(dòng)物脾細(xì)胞(如小鼠B淋巴細(xì)胞)和具有永生功能的腫瘤細(xì)胞(如小鼠骨髓瘤細(xì)胞)。被特異性抗原免疫的免疫動(dòng)物脾細(xì)胞(B淋巴細(xì)胞)的主要特征是它的抗體能夠分泌產(chǎn)生結(jié)合抗原特定位置(表位)的抗體,但其自身不能在體外連續(xù)培養(yǎng),具有永生功能的腫瘤細(xì)胞(骨髓瘤細(xì)胞)則可在培養(yǎng)條件下無(wú)限分裂、增殖,即具有所謂永生性。在選擇培養(yǎng)基的作用下,只有由一個(gè)B淋巴細(xì)胞與一個(gè)骨髓瘤細(xì)胞融合的雜交瘤細(xì)胞才能具有持...

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