隨著重組蛋白技術的進一步完善，真核哺乳動物細胞蛋白表達系統(tǒng)憑著蛋白折疊和完善的翻譯后休息系統(tǒng)，表達的抗體更接近天然構象，從而具有和天然抗體相同的生物活性，因此常用于功能蛋白、抗體及臨床疫苗的生產。艾柏森生物提供工業(yè)級別重組IgG、Fab和ScFv等抗體片段的制備和純化服務。

瞬時轉染表達

瞬時轉染（transienttransfection）是將重組抗體基因導入真核細胞的方式之一。在瞬時轉染中，重組DNA導入感染性強的細胞系以獲得目的基因暫時但高水平的表達。轉染的DNA不必整合到宿主染色體，可在比穩(wěn)定轉染較短時間內收獲轉染的細胞，并對溶解產物中目的基因的表達進行檢測。艾柏森提供從基因優(yōu)化、載體構建、瞬轉HEK293細胞/CHO細胞、表達純化小試以及大規(guī)模發(fā)酵服務?？梢远虝r間內生產mg至g級重組IgG。

構建穩(wěn)定細胞系

構建目的基因的表達質粒后，可通過電轉、慢病毒轉染等方法，將質粒轉染至宿主細胞。選用DHFR /GS基因表達系統(tǒng),將轉染的細胞培養(yǎng)在合適的選擇性培養(yǎng)基中，然后進行MTX/MSX壓力篩選,以產生穩(wěn)定細胞庫。

艾柏森生物使用MolecularClonePix2系統(tǒng),高通量、自動化的篩選出100-200個高水平分泌克隆，并從中挑選10-20個高產克隆，進行下一步的穩(wěn)定性測試。我們挑選出10個克隆，進行10次傳代后，qPCR和WB法檢測細胞株的穩(wěn)定性。我們提供序列及載體報告, 3株表達的細胞株，表達分析、穩(wěn)定性測試報告以及詳細的穩(wěn)定細胞株構建報告。

IgG構建服務簡介

VL和VH基因片段的密碼子優(yōu)化和基因合成

表1 噬菌體展示技術服務項目：IgG的重組表達生產