隨著AI輔助抗體設(shè)計(jì)(如RoseTTAFold)和類器官模型的應(yīng)用，抗體開發(fā)周期已縮短至數(shù)周。第三代測序技術(shù)結(jié)合單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組學(xué)，可實(shí)現(xiàn)從患者樣本直接篩選個(gè)性化治療抗體。此外，基因編輯技術(shù)(如CRISPR-Cas9)正推動(dòng)全人源抗體庫構(gòu)建，有望解決鼠源抗體的免疫原性問題。抗體制備技術(shù)憑借其準(zhǔn)確性、多功能性和持續(xù)創(chuàng)新潛力，已成為生物醫(yī)藥領(lǐng)域不可少的工具，持續(xù)推動(dòng)著準(zhǔn)確醫(yī)療和生命科學(xué)研究的邊界拓展。
 

　　抗體制備的技術(shù)流程：
 

　　1.抗原設(shè)計(jì)與免疫
 

　　-純化重組蛋白或合成多肽作為免疫原，偶聯(lián)載體蛋白(如KLH)增強(qiáng)免疫原性。
 

　　-采用佐劑(如弗氏佐劑)延緩抗原釋放，延長免疫刺激時(shí)間。
 

　　-通過皮下、腹腔或靜脈注射途徑接種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(常用BALB/c小鼠)。
 

　　2.抗體檢測與篩選
 

　　-間接ELISA法測定血清抗體效價(jià)，Western blot驗(yàn)證抗原特異性。
 

　　-雜交瘤技術(shù)中，通過有限稀釋法篩選陽性克隆，并利用同源重組技術(shù)敲除內(nèi)源免疫球蛋白基因以提高產(chǎn)量。
 

　　3.抗體優(yōu)化與規(guī)模化生產(chǎn)
 

　　-對候選抗體進(jìn)行人源化改造(CDR移植或框架區(qū)修飾)，降低異源性。
 

　　-采用CHO細(xì)胞或酵母表達(dá)系統(tǒng)進(jìn)行無血清懸浮培養(yǎng)，通過蛋白A親和層析純化。

 

　　抗體制備的核心優(yōu)勢：
 

　　1.高特異性與低交叉反應(yīng)
 

　　單克隆抗體僅識(shí)別單一抗原表位，優(yōu)于多克隆抗體的廣譜性。例如，PD-1抑制劑納武利尤單抗可準(zhǔn)確阻斷T細(xì)胞抑制信號，而不影響其他免疫檢查點(diǎn)通路。
 

　　2.結(jié)構(gòu)可控與功能可調(diào)
 

　　通過Fab片段工程化改造可實(shí)現(xiàn)抗體藥物偶聯(lián)物(ADC)的準(zhǔn)確載藥，如恩美曲妥珠單抗(T-DM1)將化療藥物定向輸送至HER2陽性腫瘤細(xì)胞。
 

　　3.應(yīng)用范圍廣泛
 

　　-疾病診斷：膠體金試紙條利用雙抗體夾心法實(shí)現(xiàn)新冠抗原快速檢測(靈敏度達(dá)1 ng/mL)。
 

　　-靶向治療：貝伐珠單抗通過抑制VEGF阻斷腫瘤血管生成，延長結(jié)直腸癌患者生存期。
 

　　-基礎(chǔ)研究：ChIP-seq技術(shù)依賴抗體富集特定DNA結(jié)合蛋白，揭示基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。
 

　　4.技術(shù)迭代推動(dòng)產(chǎn)業(yè)升級
 

　　雙特異性抗體(BsAb)可同時(shí)結(jié)合兩個(gè)靶點(diǎn)(如CD3×BCMA)，激活T細(xì)胞殺傷多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞；納米抗體(VHH)因體積小、穩(wěn)定性高，已用于構(gòu)建口服疫苗載體。