單抗制備技術(shù)是現(xiàn)代生物醫(yī)藥領(lǐng)域的一個重大突破，它不僅提高了抗體藥物的療效和安全性，也為疾病的診斷和研究提供了強(qiáng)大的工具。隨著科技的進(jìn)步，其應(yīng)用范圍還在不斷擴(kuò)大，未來有望帶來更多創(chuàng)新的治療手段和診斷方法，它被廣泛應(yīng)用于免疫分析、疾病治療以及生物學(xué)基礎(chǔ)研究等領(lǐng)域。下面將詳細(xì)介紹的選購及操作指南：
 

　　單抗制備方法：
 

　　1.動物免疫
 

　　-選擇動物種類：根據(jù)所需抗體的用途和量來決定動物種類。量大時可選擇羊、馬等大動物；量少時家兔、豚鼠等小動物更為合適。
 

　　-制定免疫方案：根據(jù)抗原特性選擇合適的免疫方案，可溶性抗原通常需要加入佐劑以增強(qiáng)免疫反應(yīng)。
 

　　2.抗原制備與注射
 

　　-抗原處理：抗原需與佐劑等體積混合并研磨成乳糜狀，以優(yōu)化免疫反應(yīng)的效率和效果。
 

　　-注射劑量與途徑：初次免疫通常使用50ug抗原進(jìn)行皮下多點(diǎn)注射，之后間隔3周進(jìn)行第二次免疫。
 

　　3.細(xì)胞融合與篩選
 

　　-融合過程：將免疫動物的脾細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，獲得雜交瘤細(xì)胞。
 

　　-篩選雜交瘤細(xì)胞：通過特定的篩選方法，識別出能夠分泌目標(biāo)抗體的陽性單克隆雜交瘤細(xì)胞，并進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)。
 

　　4.抗體檢測與克隆化
 

　　-單抗檢測：對分泌的抗體進(jìn)行鑒定，確認(rèn)其特異性和親和力等屬性，確保所產(chǎn)抗體符合實(shí)驗或臨床需求。
 

　　-克隆化：陽性的雜交瘤細(xì)胞需要進(jìn)行克隆化，以確保獲得穩(wěn)定分泌特定抗體的細(xì)胞克隆。
 

　　5.抗體的生產(chǎn)與純化
 

　　-生產(chǎn)：通過體外培養(yǎng)克隆化的雜交瘤細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)大量抗體的生產(chǎn)。
 

　　-純化：利用各種生物化學(xué)技術(shù)，如蛋白A/G親和層析，以提高抗體的純度和質(zhì)量，滿足后續(xù)實(shí)驗或臨床應(yīng)用的需求。